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分子生物学技术miRNA

  • 多重PCR反应中关键因素和实验步骤

    摘要:多重pcr通过在同一个反应中同时完成多个基因的扩增成为临床与基础研究领域中一种简便快捷的筛选检测方法。已有大量文献详细的讨论了通常影响PCR反应质量的条件,而在多重PCR中常见的困难和重要的实验因素却鲜见报道。本文使用多对引物对多重PCR的各种条件进行了研究。研究表明,对于成功进行......

    2017-06-15
  • 荧光定量PCR实验步骤及注意事项

    荧光定量pcr实验步骤1、总RNA抽提(枪头和离心管均经过湿热灭菌,无RNA酶)1)取匀浆器,加入1ml的TrizolReagent,置冰上预冷。2)取100mg组织,加入到匀浆器中。3)充分研磨直至无可见组织块。4)13000g离心10min取上清。5)加入250μl三氯甲烷,颠倒离心管15s,充分混匀,静置3min。6)4℃下13000g离心8min。7)将上清转移......

    2017-06-15
  • 有关融合蛋白表达系统方面的巨大突破

    研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达――即:有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期,人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后,认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多,除了要有强......

    2017-06-15
  • Northern blot技术

    一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Miller,1987),但用含朋乙二......

    2017-06-11
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