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细胞实验技术

  • 细胞培养常用试剂

    (1)高糖DMEM溶液用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(规格10×1L),溶入约总量的1/3的三蒸水,并用水洗净包装袋,在磁力搅拌器上搅拌30分钟,加入NaHCO23.75克,补加水至最终量。用1NHCL调整PH为7.2,0.22μm滤膜抽滤除菌,分装-20℃保存,使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液(最终浓度:青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml)(2)胎......

    2017-06-19
  • 红细胞形态学诊断技巧

    1.RBC的Hb、网织RBC、MCV、MCH、MCHC及RBC体积分布宽度(RDW)是判定贫血类型重要依据:(1)Hb/RBC比值:正常人:Hb/RBC比值为3gHb/L=100万RBC/μL即3:1。AA、溶血性贫血及继发性贫血等属此类。>3:1者即为大细胞高色素性贫血,<3:1者为小细胞低色素性贫血.(2)网织RBC是新生的RBC,可反映造血机能的好坏。正常情况......

    2017-06-16
  • 把细胞铺匀的7个小技巧

    做cellbiology实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。以下是我的一些技巧,希望可以帮助到大家。1.一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再,继续加剩余的半......

    2017-06-16
  • 预防细胞污染及污染后对策

    污染向来是在细胞培养中的大问题。预防或治理污染是细胞培养成功的关键因素。我们在细胞培养时,在开始阶段就要十分重视污染问题,否则会前功尽弃,这样不仅浪费时间,也会浪费人力、物力。(一)有哪几类污染?在细胞培养过程中的污染不只是指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造......

    2017-06-16
  • MTT 实验

    实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致......

    2017-06-16
  • 提取细胞质和细胞核蛋白方法

    操作步骤:1.决定细胞生长状态,细胞生长状态应该是80%或者更好:2.用离心机以1500r/min离心5min3.弃上清液,用等体积的冷PBS洗细胞,像步骤2那样,反复3次4.根据估计的沉淀量加入5倍体积的isotoniclysisbuffer到细胞颗粒中,使细胞温和悬浮,尽量避免泡沫5.加入裂解液lysisbuffer在悬浮的细胞中,并放在冰上15......

    2017-06-16
  • 常用细胞凋亡检测方法

    细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1光学显......

    2017-06-16
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