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【课题实验整体外包】-PP1γ基因DNA甲基化在学习记忆中的作用

目的: 研究蛋白磷酸酶1γ和DNA甲基化在学习记忆中的作用。

方法: 通过DNA甲基化转移酶(DNA methytransferases,DNMTs)抑制剂5-aza-cdR处理小鼠,观察小鼠学习记忆情况及其PP1γ表达变化,通过水迷宫测定小鼠的学习记忆能力,Real-time PCR 检测小鼠海马区DNMTs和PP1γ mRNA转录水平以及Western-Blot测定PP1γ的蛋白质表达水平。为了进一步探讨5-aza-cdR对小鼠学习记忆的影响是否与细胞增殖和凋亡有关,用5-aza-cdR 处理NG108-15神经细胞,流式细胞仪、xCelligence系统和荧光素酶报告基因分别检测5-aza-cdR对细胞增殖、凋亡和PP1γ的转录活性的影响。

结果: 侧脑室注射了5-aza-cdR的小鼠空间学习记忆能力增加,同时小鼠海马区的DNMTs和PP1γ的表达降低;10 μmol/L 5-aza-cdR抑制细胞增殖,降低PP1γ的转录活性,但是没有诱导细胞凋亡。

结论: 5-aza-cdR对PP1γ的表达抑制与小鼠学习记忆有关。

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