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如何制作病理大体标本?

一、大体标本的收集

大体病变标本的收集工作主要依赖病理工作人员在解剖动物尸体或在进行活体病变检查时发现并收集。在日常的动物临床剖检工作中,应注意收集典型具有教学价值和适合固定后展示的病理标本来不断地补充教学内容。标本收集是一项有意义的长期连续性工作。当遇到典型病变标本的时候,首先要保护病变特点和器官完整性,经过适当取材和修整后及时固定。标本采取是大体标本制作的关键一环。

二、大体标本的取材

标本取材以新鲜为好,标本摘除后要及时并仔细处理,去除多余组织,平整切面。需做病理组织学检查时,可自标本背面采取组织材料块;当需要从前面采取时,要用手术刀整齐切取,以不影响标本病变观察为原则。采取的标本应及时固定,不宜长时问暴露空气中,如果标本水分丢失,则标本将干枯,颜色和形状都会变化,如标本体积缩小,形状扭曲,颜色变黑等,标本病变失真后即失去保留意义。标本固定后其形状无法改变,一般不宜再作新切面。实际工作中,应根据标本形状和大小采用相应固定方法,现分述如下。

(1)实质性器官  实质性器官(如肝、脾等)质地较硬实,不易被固定液穿透。固定前常用刀片沿器官长轴平整切成1~2 cm厚若干片,将欲展示的切面向上放在固定容器中,标本下面可垫上脱脂棉以防止底部和固定瓶接触而无固定液渗入。如需完整保留脏器,需先经血管灌注固定,再将标本放入固定液中固定。

(2)空腔器官  采取空腔器官(如胃、肠等)标本时,需先把浆膜面附带的脂肪去除,之后将器官剪开使黏膜面朝上,顺自然形状用大头针于器官周边固定在硬纸板上,之后使黏膜面向下悬于固定液中。大头针不要伤及黏膜,针尖可斜向刺入浆膜。针对膀胱、胆囊等标本,可填充脱脂棉再行固定以保持原有形状。

(3)脑  如果需要保留完整脑器官来观察脑表面病变,固定前先用生理盐水经脑基底动脉把血管中的血液冲洗干净,再用固定液充分灌注。为防止脑在固定时受压变形,可用缝线穿过脑基底动脉并把脑放入固定液中,再将缝线两头提起使之悬于固定液中。若病变不在脑的表面,最好将脑切开后分开固定。切开固定比完整固定效果好。

(4)心脏  心脏经固定液固定后收缩,当病变在心脏内表面时,通常要剖开以展示主要病变,而后再进行固定。

(5)肺脏  肺脏组织较疏松,固定液较易渗透,可完整固定或切开固定,但肺组织会在固定液中漂浮,因此在固定时肺脏标本上面可覆盖脱脂棉以防表面干燥。

(6)肾脏摘除肾脏后,可先检查表面。之后用刀自肾脏外侧切向肾门,将肾切成两半。检查肾脏实质和肾盂,据病变位置决定保留哪一侧肾脏或保留双侧。

(7)骨组织标本骨组织坚硬,制作标本难度较大。如果只需观察骨正常结构,可用锯做一整齐剖面。实际工作中,骨组织标本制作的主要内容是骨肿瘤。骨肿瘤标本的固定同软组织标本固定,固定时间可适当延长,因骨组织坚硬,骨肿瘤组织也较致密。

固定标本应该选择较大容器,固定液要充足,一般为标本体积的10倍。一般情况下,应先配制固定液,再放入标本。

三、大体标本的固定和保存

1.大体标本的固定液

(1)福尔马林法固定  市售甲醛浓度一般为40%(又称福尔马林),通常作为100%使用。固定组织的使用浓度为10%(40%的甲醛原液10 mL加蒸馏水90 mL),习惯称10%福尔马林溶液。标本大小不同,固定时间不同,一般7~14 d。之后用水冲洗12~24 h,去除多余组织,放于容器内后再添加10%福尔马林液并封装。固定后的标本变硬,颜色灰白。

(2)麦兆煌氏法固定  麦兆煌氏法固定所用药品均价廉易得,标本色泽经久不变,固定需使用3种液体:

①固定液  甲醛液(37%~40%)100 mL;醋酸钠50 g;水1 000 mL。固定3周后转入第二液,使标本回色。

②第二液  85%~90%酒精,固定2~4 h。

③保存液  硫酸镁100 g;醋酸钠50~80 g;蒸馏水1 000 mL;麝香草酚少量。

(3)原色保存液  标本经10%福尔马林固定液固定约1周,取出后用自来水冲洗12~24 h,晾干后放入70%~80%酒精中4~8 h回色,当色泽回复后取出标本,晾干,再放入饱和盐水中封固。可用硫酸镁100 g,醋酸钠50~80 g,蒸馏水1000 mL代替饱和盐水。

2.封固和标签

大体标本可用玻璃标本瓶或有机玻璃标本瓶,标本不放在太阳直射及温度较高的房间。

标本装瓶后要贴标签,标明器官名称、病变名称、日期及编号等必要项目。

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